5
藥典方案集錦 | 按典索驥-聚維酮系列二：2-吡咯烷酮方法深度解析
精彩回顧
上期分享我們深度探討了聚維酮中雜質(zhì) N-乙烯-2-吡咯烷酮的解決方案，了解到 2025 版《中國藥典》、USP、EP 中 N-乙烯-2-吡咯烷酮分析方法完全一致，而 USP、EP 方法中最大的特點是通過閥切換對樣品進行在線預處理，從而實現(xiàn)樣品在線凈化。
本期我們將繼續(xù)以 2025 版《中國藥典》更新的質(zhì)量標準為基礎，同時參考 USP 和 EP 標準方法，探討聚維酮中另一液相檢查項 2-吡咯烷酮解決方案。
各國藥典標準對比
對比各國藥典中 2-吡咯烷酮檢測方法，我們發(fā)現(xiàn) USP 和 EP 的色譜條件完全一致，并且均采用在線自動閥切換方案反沖預柱（Online SPE）；相比之下，中國藥典色譜條件差異較大：未提及預柱反沖方案，其流動相組成、系統(tǒng)適應性要求略有不同，對照液濃度、進樣體積等條件不同。
中國藥典、USP 和 EP 具體方法對比如下：
方案一：參照 25 版《中國藥典》方法，設置如下液相分析方法：
分析系統(tǒng)：
色譜條件：
在此條件下，運行 2-吡咯烷酮對照溶液和聚維酮樣品溶液，結(jié)果如下：對照溶液 2-吡咯烷酮（2-VP）連續(xù)運行 6 針，峰面積 RSD% 為 0.08%，符合藥典 2.0% 以內(nèi)的限度要求；對照系列溶液在（10.06-120.60）μg/mL 濃度范圍內(nèi)線性良好（r>0.9999）。
圖 1. 2-吡咯烷酮對照溶液色譜圖和精密度結(jié)果
圖 2. 2-吡咯烷酮線性溶液色譜圖和標準曲線（r=0.99991）
圖 3. 2025 版藥典聚維酮樣品溶液色譜圖
綜合上述數(shù)據(jù)得出：按照 25 版中國藥典方法測試聚維酮樣品，可有效分析雜質(zhì) 2-吡咯烷酮。
在 USP、EP 收載的標準方法中，2-吡咯烷酮采用 OnlineSPE 功能，先將主成分聚維酮保留在預柱中，通過閥切換，實現(xiàn)分析柱測試樣品中雜質(zhì)組分，主成分聚維酮被流動相反沖至廢液，有效保護了色譜柱。
方案二：USP、EP OnlineSPE 色譜方法：
分析系統(tǒng)：
清洗系統(tǒng)：
色譜條件：
圖 4. 閥切換示意圖（切閥時間：2 分鐘）
在 USP、EP 方法條件下，運行 2-吡咯烷酮對照溶液和聚維酮樣品溶液，結(jié)果如下：2-吡咯烷酮（2-VP）對照液連續(xù)運行 6 針，其峰面積和保留時間的精密度均在 0.2% 以內(nèi)，峰拖尾因子 1.4，符合藥典要求。
圖 5. 對照溶液色譜圖和精密度結(jié)果
圖 6. OnlineSPE 法聚維酮樣品溶液色譜圖
按照 USP、EP 標準方法測試聚維酮樣品（不切閥），在 2-吡咯烷酮雜質(zhì)出峰后，流動相設置為梯度洗脫，如下圖色譜圖所示，在高比例有機相條件下，可將吸附在色譜柱中的主成分洗脫出來，由此證明：在當前藥典條件下，沒有 OnlineSPE 樣品在線處理時，色譜柱中吸附了高濃度的低極性組分，長此以往使用，將會嚴重損害色譜柱壽命。
圖 7. 聚維酮樣品色譜圖
以聚維酮樣品 K25 為例，采用 USP、EP 不切閥方案和 OnlineSPE 方案對比研究發(fā)現(xiàn)：相同樣品，兩種方案所得雜質(zhì)峰面積一致，證明 OnlineSPE 方案對雜質(zhì)分析無損失，結(jié)果真實可靠；同時，采用在線自動閥切換方案對樣品進行 OnlineSPE 處理，去除不需要的主成分至廢液，保留雜質(zhì)組分進行分析測試，真正達到了降低液相分析系統(tǒng)和色譜柱損耗的效果。
?結(jié)語
采用《中國藥典》收載方法，搭配 Agilent XDB-C18 色譜柱，對聚維酮中雜質(zhì) 2-吡咯烷酮進行測試，結(jié)果符合藥典規(guī)定。
USP、EP 中的 OnlineSPE 聯(lián)合分析測試方案，可將預柱中聚維酮組分反沖至廢液。該方案在不改變藥典既定方法的基礎上，增加 OnlineSPE 樣品處理步驟，其分析方法和藥典要求完全一致。OnlineSPE 方案的優(yōu)勢在于，既能保護液相分析系統(tǒng)免受污染，又能精準重現(xiàn)藥典方法的分析結(jié)果，真正實現(xiàn)了凈化系統(tǒng)和有“法”可依的雙贏效果。