實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
研究對(duì)象選用216只5周齡斷奶Hyla兔(僅選用雌性兔子,以排除性別差異對(duì)脂肪代謝的影響),隨機(jī)分為2組,每組108只。
白天喂養(yǎng)組(DF):早上7:00(日出時(shí)間)喂食,全天自由采食;
夜間限制性喂養(yǎng)組(NRF):下午5:00(日落時(shí)間)喂食,僅在此時(shí)間至次日早上7:00期間可采食。
動(dòng)物行為學(xué)監(jiān)測(cè)
使用紅外攝像頭全天候記錄兔子行為,從每組選取3只兔子進(jìn)行重點(diǎn)觀察,從實(shí)驗(yàn)第88天至92天(連續(xù)5天)。研究的行為學(xué)監(jiān)測(cè)部分采用了諾達(dá)思的行為觀察記錄分析系統(tǒng)(The Observer XT),對(duì)以下行為進(jìn)行編碼和記錄:
采食行為
飲水行為
行走行為
躺臥行為
梳理毛發(fā)行為
其他監(jiān)測(cè)
除了行為學(xué)監(jiān)測(cè),研究人員使用獸醫(yī)直腸電子體溫計(jì)測(cè)量直腸溫度。除此之外,在兔子14周齡時(shí),每組各取72只兔子,在24小時(shí)內(nèi)每隔4小時(shí),采集血清、肝臟、肌肉和脂肪組織樣本。測(cè)定包括三碘甲狀腺原氨酸和甲狀腺素的血清濃度。測(cè)量血清中糖皮質(zhì)激素和瘦素水平,以及總膽固醇。對(duì)肝臟組織橫向冷凍切片進(jìn)行中性脂質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)。測(cè)量肝臟甘油三酯、總膽固醇和β-羥基丁酸水平。檢測(cè)脂肪組織中PPARγ蛋白的表達(dá)水平。測(cè)量分析肌肉內(nèi)脂肪比例。另外,檢測(cè)肝臟、肌肉和脂肪組織中生物鐘基因和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)水平等。
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