| 供貨周期 |
一個月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè) |
T細胞白血病細胞是起源于T淋巴細胞的惡性腫瘤細胞,涵蓋不同發(fā)育階段,如急性T淋巴細胞白血?。═-ALL)和T-大顆粒淋巴細胞白血?。═-LGLL)。常用人源細胞系包括6T-CEM(HGPRT缺陷,適于雜交瘤)、HSB-2(具t(1;7)易位)及C8166-CD4等。懸浮生長,表達CD3、CD7等T系標(biāo)志,廣泛用于白血病機制、免疫逃逸及藥物篩選研究。
T細胞白血病細胞
T細胞白血病細胞是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測試劑盒,可特異性檢測相關(guān)細胞培養(yǎng)樣本中T細胞白血病標(biāo)志物、免疫相關(guān)因子、腫瘤增殖凋亡相關(guān)蛋白及信號通路相關(guān)分子的含量,也可用于該細胞培養(yǎng)過程中增殖活性監(jiān)測、免疫表型評估及藥物作用效果檢測,經(jīng)特異性驗證、靈敏度測試及重復(fù)性實驗確認(rèn),無交叉反應(yīng),檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。該細胞株是起源于T淋巴細胞的惡性腫瘤細胞株,保留T淋巴細胞的部分免疫特性,同時具備白血病細胞的惡性增殖特征,核心特性是表達T細胞白血病特異性標(biāo)志物(如CD3、CD4、CD8、CD56),可分泌免疫相關(guān)細胞因子,參與免疫紊亂及白血病發(fā)生發(fā)展過程,廣泛應(yīng)用于T細胞白血病發(fā)病機制研究、免疫調(diào)控機制研究、抗腫瘤藥物篩選等領(lǐng)域,是評估該細胞功能、免疫表型及藥物干預(yù)效果的重要研究模型,可用于驗證抗腫瘤藥物對該細胞增殖的抑制作用及免疫調(diào)控相關(guān)通路的干預(yù)效果研究。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速,可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量,廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)科研、免疫學(xué)科研、藥物研發(fā)、細胞生物學(xué)實驗等領(lǐng)域,是臨床、科研領(lǐng)域的核心該細胞相關(guān)檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦相關(guān)細胞檢測指標(biāo)(白血病標(biāo)志物、免疫相關(guān)因子、增殖凋亡蛋白、信號通路分子等)的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合該細胞功能檢測的精準(zhǔn)需求設(shè)計:試劑盒預(yù)先將目標(biāo)檢測指標(biāo)(如CD3、CD4、CD8、免疫相關(guān)細胞因子、STAT3信號分子)特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測樣本(相關(guān)細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液等)后,樣本中的目標(biāo)指標(biāo)會與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、細胞碎片、無關(guān)細胞因子及其他免疫細胞相關(guān)蛋白后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“包被抗體-目標(biāo)指標(biāo)-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強度與樣本中目標(biāo)指標(biāo)的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣本中目標(biāo)指標(biāo)的具體含量。檢測流程規(guī)范:樣本采集后需及時處理(相關(guān)細胞培養(yǎng)上清離心分離、細胞裂解液制備),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定OD值,計算檢測結(jié)果。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品針對相關(guān)細胞指標(biāo)檢測需求優(yōu)化制備,核心特點如下:
特異性強:采用高特異性目標(biāo)指標(biāo)(白血病標(biāo)志物CD3、CD4、CD8、CD56、免疫相關(guān)因子、STAT3信號分子等)單克隆抗體,可特異性結(jié)合樣本中的目標(biāo)分子,不與正常T淋巴細胞雜蛋白、其他腫瘤細胞系蛋白及無關(guān)因子發(fā)生交叉反應(yīng),檢測特異性>99%,確保檢測結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避相關(guān)檢測中的干擾因素,同時可有效區(qū)分白血病特異性標(biāo)志物的假陽性與真實表達水平及免疫因子的分泌差異;
質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測,附完整QC報告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測靈敏度可達0.1ng/mL,符合科研標(biāo)準(zhǔn),可精準(zhǔn)監(jiān)測相關(guān)細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)指標(biāo)的微量變化,助力藥物干預(yù)效果及免疫調(diào)控效果評估;
操作便捷:試劑盒含全套檢測試劑(包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡單,全程可在2.5小時內(nèi)完成,適配常規(guī)細胞生物學(xué)實驗室操作,新手易上手;
樣本兼容廣:可適配相關(guān)細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液、細胞接種后小鼠血清/淋巴組織勻漿等核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配細胞培養(yǎng)、藥物篩選、白血病發(fā)病機制及免疫調(diào)控機制研究等多場景樣本;
適配場景廣:可用于相關(guān)細胞增殖活性監(jiān)測、免疫表型評估、白血病標(biāo)志物及信號通路相關(guān)分子表達檢測,白血病發(fā)病機制、免疫調(diào)控機制研究,抗腫瘤藥物(hua療藥、靶向藥、免疫調(diào)節(jié)劑)的篩選與效果評估,以及腫瘤學(xué)科研、免疫學(xué)科研、藥物研發(fā)實驗室的常規(guī)檢測。
適用樣本類型
本試劑盒適配相關(guān)細胞樣本的體外檢測與科研實驗,適用樣本類型明確:相關(guān)細胞培養(yǎng)上清樣本(對數(shù)期細胞培養(yǎng)上清,離心去除細胞碎片)、細胞裂解液樣本(無菌收集細胞后裂解,離心取上清)、細胞接種后小鼠血清樣本(靜脈采血,離心分離,避免溶血)、淋巴組織勻漿樣本(淋巴組織破碎后離心取上清);實驗場景涵蓋相關(guān)細胞增殖、免疫表型監(jiān)測,白血病標(biāo)志物及信號通路相關(guān)分子表達檢測,白血病發(fā)病機制、免疫調(diào)控機制研究,相關(guān)藥物篩選與效果評估,以及相關(guān)實驗室的常規(guī)檢測。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(細胞裂解液、淋巴組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL(具體以說明書為準(zhǔn))。(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書,該細胞為懸浮腫瘤細胞,培養(yǎng)需遵循懸浮腫瘤細胞培養(yǎng)規(guī)范,采用淋巴細胞專用培養(yǎng)基(可選用RPMI-1640培養(yǎng)基添加10%胎牛血清及雙抗),接種密度不低于50萬個/mL,復(fù)蘇后需給予一定恢復(fù)期,定期觀察細胞形態(tài)、增殖狀態(tài)、免疫表型及活性,避免密度過低導(dǎo)致不增殖,維持細胞懸浮狀態(tài)避免聚團影響檢測結(jié)果,培養(yǎng)環(huán)境為5%CO?、37℃恒溫培養(yǎng)箱)
儲存與注意事項
試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失;
標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個月內(nèi)用完,目標(biāo)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞,底物液需避光保存;
樣本采集后及時處理,相關(guān)細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液冷藏24小時內(nèi)完成檢測,小鼠血清、淋巴組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時內(nèi)完成檢測,避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)降解,細胞樣本需新鮮采集,避免細胞活力下降、免疫表型異常影響檢測結(jié)果;
操作時嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范,佩戴防護用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測過程中控制孵育溫度與時間,洗滌充分,避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差;
底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時需謹(jǐn)慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板;
相關(guān)細胞樣本需無菌采集與處理,細胞裂解液需充分裂解細胞,離心去除細胞碎片及雜質(zhì)后再進行檢測,避免雜質(zhì)干擾檢測結(jié)果;培養(yǎng)上清需在細胞對數(shù)期采集,避免細胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)指標(biāo)降解,同時避免培養(yǎng)體系中血清濃度過高影響檢測準(zhǔn)確性,藥物干預(yù)實驗及免疫調(diào)控干預(yù)實驗中需避免藥物或調(diào)控試劑本身干擾檢測結(jié)果,免疫表型檢測實驗中需注意樣本采集時機。
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。