| 供貨周期 |
一個月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè) |
EB病毒感染的人外周淋巴細胞主要指EB病毒在體內(nèi)外靶向感染人外周血B淋巴細胞,使其進入潛伏感染狀態(tài)并永生化。被感染的B細胞激活并持續(xù)增殖,成為淋巴母細胞,可建立永jiu生長的類淋巴母細胞系。該過程與傳染性單核細胞增多癥、移植后淋巴組織增殖癥及多種淋巴瘤的發(fā)生密切相關(guān),是研究病毒潛伏-裂解轉(zhuǎn)換及腫瘤發(fā)生的經(jīng)典模型。
EB病毒感染的人外周淋巴細胞
EB病毒感染的人外周淋巴細胞,是通過EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)特異性感染人外周血淋巴細胞,誘導(dǎo)其發(fā)生永生化轉(zhuǎn)化形成的淋巴母細胞系,是科研領(lǐng)域常用的標(biāo)準(zhǔn)化實驗材料。該細胞系核心優(yōu)勢在于可在體外長期穩(wěn)定培養(yǎng),同時完整保留人外周淋巴細胞的部分免疫表型與生物學(xué)功能,攜帶EBV基因組并可長期潛伏表達相關(guān)抗原,生物安全等級為BSL-2。該細胞系經(jīng)嚴格質(zhì)量鑒定,無細菌、真菌、支原體及無關(guān)病毒污染,細胞活力高、代次低,生物學(xué)特性穩(wěn)定,可廣泛應(yīng)用于人類遺傳學(xué)、免疫學(xué)、病毒學(xué)、腫瘤學(xué)等多個科研領(lǐng)域,為相關(guān)實驗研究提供可靠的體外細胞模型支撐,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)及各級醫(yī)院科研部門的實驗需求。
檢測原理
本產(chǎn)品的核心檢測是EBV感染有效性驗證、細胞純度及活性鑒定,結(jié)合細胞生物學(xué)與分子生物學(xué)檢測方法,確保細胞系的真實性與穩(wěn)定性,具體原理如下:一是EBV感染驗證,采用免疫熒光法或Western Blot法,檢測細胞內(nèi)EBV相關(guān)抗原(如EBNA、VCA)的表達,或通過PCR技術(shù)檢測EBV基因組特異性片段,確認細胞已成功被EBV感染并實現(xiàn)永生化;二是細胞活性檢測,采用臺盼藍染色法,利用活細胞細胞膜完整、不被臺盼藍染色,死細胞細胞膜破損、被染成藍色的特性,計數(shù)活細胞比例,評估細胞活性;三是細胞純度檢測,通過流式細胞術(shù)檢測細胞表面CD21(EBV受體)、CD19(B淋巴細胞特異性標(biāo)志物)的表達,排除雜細胞污染,確保細胞系純度;四是污染檢測,采用微生物培養(yǎng)法檢測細菌、真菌污染,PCR法檢測支原體污染,確保細胞無外源污染,保障實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品針對科研實驗需求優(yōu)化制備,兼具穩(wěn)定性、特異性與實用性,核心特點如下:1. 永生化特性突出,可在體外長期穩(wěn)定培養(yǎng),倍增時間約2-3天,無需頻繁分離原代人外周血淋巴細胞,大幅降低實驗人力與時間成本,同時避免原代細胞來源有限的問題;2. 生物學(xué)特性穩(wěn)定,經(jīng)多代傳代后仍能保留人外周淋巴細胞部分免疫功能及EBV潛伏感染狀態(tài),染色體核型保持人類正常二倍體,無明顯變異,保障實驗數(shù)據(jù)的一致性;3. 特異性強,僅由EBV感染人外周血淋巴細胞轉(zhuǎn)化形成,可特異性表達EBV相關(guān)抗原,部分細胞系可釋放高滴度EBV,適配EBV相關(guān)專項研究及人EBV感染機制研究;4. 細胞活力高,產(chǎn)品出廠前經(jīng)嚴格篩選,細胞活力≥95%,代次控制在5代以內(nèi),復(fù)蘇后存活率高,可快速適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境;5. 無外源污染,經(jīng)嚴格QC檢測,確保無細菌、真菌、支原體及無關(guān)病毒污染,提供完整檢測報告;6. 適配性廣,可兼容RPMI 1640、IMDM等多種培養(yǎng)基,支持懸浮培養(yǎng),部分細胞可適應(yīng)缺氧培養(yǎng)條件,適配免疫、病毒、遺傳等多種科研實驗場景;7. 實用性強,可直接用于實驗,無需額外進行轉(zhuǎn)化操作,廠家提供全程技術(shù)指導(dǎo),降低實驗門檻。
適用樣本類型
本產(chǎn)品為成品,適配各類科研實驗場景,可直接用于相關(guān)實驗操作,其對應(yīng)的原代樣本來源及成品細胞適用的實驗樣本形式如下:原代樣本來源為健康人群外周血淋巴細胞,經(jīng)EBV轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化過程中加入環(huán)孢mei素A抑制T淋巴細胞,提升轉(zhuǎn)化效率)后形成成品細胞系,完整保留人外周淋巴細胞相關(guān)生物學(xué)特性;成品細胞可直接作為實驗樣本,用于體外培養(yǎng)、藥物處理、分子檢測、免疫實驗等,適配的實驗樣本形式包括細胞懸液、細胞裂解液、細胞爬片等,可滿足EBV感染機制、免疫功能、藥物篩選等不同實驗檢測需求。
備注:(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 復(fù)蘇狀態(tài)細胞:收到細胞后,立即置于37℃、5%CO?恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24小時內(nèi)完成換液,短期儲存(1-7天)可維持該培養(yǎng)條件,避免頻繁移動培養(yǎng)瓶;2. 凍存狀態(tài)細胞:采用液氮(-196℃)長期儲存,凍存液配方為30%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+60%胎牛血清+10%DMSO,分裝至凍存管后經(jīng)程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮)處理,避免反復(fù)凍融;3. 未開封配套試劑(如凍存液、復(fù)蘇輔助試劑):2-8℃冷藏避光保存,有效期內(nèi)使用,嚴禁冷凍。
(二)注意事項
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用,不可用于人類或動物臨床診斷、治療,非藥用、非食用,操作需在BSL-2生物安全實驗室進行,嚴格遵循無菌操作規(guī)范及血液制品處理預(yù)防措施;2. 細胞培養(yǎng)過程中,實驗器材需徹di滅菌,移液器吸頭一次性使用,避免交叉污染,不可擅自更換培養(yǎng)基體系或血清比例,定期觀察細胞狀態(tài),及時換液、傳代,確保細胞生物學(xué)特性穩(wěn)定;3. 收到細胞后需立即檢查,若出現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液、培養(yǎng)液渾濁或細胞活力異常,及時與廠家聯(lián)系反饋;4. 細胞復(fù)蘇時需快速解凍(37℃水浴5-10分鐘),避免DMSO損傷細胞,復(fù)蘇后及時離心洗滌,培養(yǎng)過夜后檢查細胞狀態(tài);5. 部分細胞系(如B95-8衍生系)可能攜帶松鼠猴逆轉(zhuǎn)錄病毒(SMRV-B95-8),操作時需加強防護,廢棄細胞及培養(yǎng)廢液按生物安全規(guī)范妥善處理;6. 定期對細胞進行鑒定,包括EBV感染狀態(tài)、細胞純度及污染情況,防止細胞變異或污染;7. 凍存細胞復(fù)蘇后建議盡快使用,未使用的細胞需按規(guī)范凍存,避免反復(fù)凍融影響細胞活性及生物學(xué)特性穩(wěn)定性。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。