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突破性進展：DxFLEX 11色單管方案實現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤MRD精準檢測
多發(fā)性骨髓瘤MRD檢測的
臨床意義
多發(fā)性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）是第二常見的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，約占血液系統(tǒng)腫瘤的10%。在過去十年中，多藥聯(lián)合治療顯著改善了MM患者的預后，使約50%的患者達到緩解。然而，傳統(tǒng)的緩解評估標準（如緩解CR、非常好的部分緩解VGPR）已無法滿足臨床需求，因為即使達到CR的患者，體內仍可能存在10-6-10-9腫瘤細胞。更敏感的微小殘留?。∕easurable Residual Disease,MRD）監(jiān)測應運而生，成為MM患者治療反應評價和預測預后的關鍵工具。
流式細胞術（Flow Cytometry）作為MRD檢測的核心技術之一，靈敏度高、多參數(shù)、檢測速度快等特點。2016年國際骨髓瘤工作組（IMWG）將MRD狀態(tài)納入緩解標準，NCCN指南和中國多發(fā)性骨髓瘤診治指南在2017年已經(jīng)將MRD陰性和持續(xù)MRD陰性作為療效判斷標準和MM治療的最好療效。MM一線治療后MRD陰性已成為總生存期和無進展生存期的替代標志物之一，并被用作多項臨床試驗的主要終點。
流式細胞術MM MRD檢測的
原理和特點
多參數(shù)流式細胞術（MFC）檢測MM MRD的核心原理是基于異常免疫表型來區(qū)分正常和異常漿細胞。正常漿細胞具有特定的免疫表型特征，而MM細胞在分化過程中會發(fā)生免疫表型異常，表現(xiàn)為某些抗原的過表達、低表達或缺失。通過多色抗體組合，可以在單個樣本中多維分離各種細胞群，對任何異常細胞群進行檢測和跟蹤。
MM MRD檢測靈敏度標準
空白限（Limit of Blank,LOB），LOB通過染色不含漿細胞的骨髓樣本確定背景事件數(shù)。LOB的計算方法為：用MM MRD方案中除漿細胞標志物（如CD138）外的所有抗體染色骨髓樣本，在預期會出現(xiàn)異常漿細胞的“空區(qū)域"設置多個門，計算這些門中檢測到的平均細胞數(shù)。LOB=空白平均值+1.645×標準差。
低檢出限（Limit of Detection,LOD），LOD定義為能夠可靠檢測到的最小異常細胞群體。根據(jù)IMWG建議，最小群體需要≥20個事件才能可靠地與空白限區(qū)分開來。LOD的計算公式為：LOD=LOB+1.645×低濃度樣本的標準差。
低定量限（Lower Limit of Quantification,LLOQ），是根據(jù)IMWG的建議通過稀釋測定獲得的。為了確定LLOQ，將含病理性漿細胞的樣本以健康供體骨髓樣本進行連續(xù)稀釋（10-3至10-5）。LLOQ設定在事件數(shù)量大約為50個細胞且變異系數(shù)（CV）不超過30%的稀釋度。
為達到MRD分析低檢測靈敏度10-5的共識建議，獲取至少5×10-6個細胞。部分高靈敏度方案要求獲取1×10-7個細胞，可將檢測靈敏度提高至10-6水平。
MM MRD檢測抗體方案組合
傳統(tǒng)流式方案通常采用“骨架抗體+異常標記物"的組合策略。CD38、CD138、CD19、CD56、CD45構成漿細胞腫瘤的“骨架"抗體，用于初步界定漿細胞群體。在此基礎上，增加CD117、CD81、CD27、CD200等異常標志物，提高異常漿細胞的識別能力。胞漿輕鏈染色是確定克隆性的關鍵步驟，通常在表面抗體染色后進行胞內染色。
核心標記物的表型及在漿細胞中的表達情況匯總如下：
在2024年發(fā)表的《基于骨髓樣本的多發(fā)性骨髓瘤微小殘留病檢測中國專家共識（2024年版）》中對檢測漿細胞腫瘤的MRD抗體8-10色組合進行推薦：
最近，發(fā)表在Cytometry B的《在臨床常規(guī)中實施單管流式細胞術組合方案以檢測多發(fā)性骨髓瘤患者的MRD》這篇文章中介紹了采用Beckman Coulter DxFLEX檢測的11色方案組合。組合方案如下：
11色MRD方案的檢測限
11色MRD方案與10色常規(guī)漿細胞方案的檢測結果對照
研究證實，11色MM MRD方案在臨床常規(guī)檢測中具有更高的靈敏度，能夠可靠地檢測多發(fā)性骨髓瘤患者的MRD狀態(tài)，為治療監(jiān)測和預后評估提供了強有力的工具。
參考文獻：
1.中華醫(yī)學會血液學分會實驗診斷學組、漿細胞疾病學組,中國醫(yī)師協(xié)會多發(fā)性骨髓瘤專業(yè)委員會. 基于骨髓樣本的多發(fā)性骨髓瘤微小殘留病檢測中國專家共識（2024年版）[J]. 中華血液學雜志,2024,45(06)：534-541.
2. Deutsch-Biedermann K, Hefler-Frischmuth K, Gruber J, et al. Implementation of a one-tube flow cytometry panel for measurable residual disease detection in multiple myeloma patients in clinical routine.Cytometry B Clin Cytom. 2025.
3. 中國醫(yī)師協(xié)會血液科醫(yī)師分會、中華醫(yī)學會血液學分會. 中國多發(fā)性骨髓瘤診治指南（2024年修訂））[J]. 中華內科雜志,2024,63(12)：1186-1195.
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