賽默飛色譜及質(zhì)譜
【藥典】化藥-全新Vanquish Core高效液相色譜系統(tǒng)用于氨基酸分析
檢測(cè)樣品:17種氨基酸混標(biāo)H型標(biāo)準(zhǔn)品
檢測(cè)項(xiàng)目:氨基酸
方案概述:本文在賽默飛全新Van-quish Core液相色譜平臺(tái)上,開(kāi)發(fā)了基于傳統(tǒng)OPA/FMOC衍生化試劑組合的在線針內(nèi)衍生紫外檢測(cè)方法,并與Hypercarb-CAD非衍生直接檢測(cè)方法比較,對(duì)比兩種方法在分析復(fù)方氨基 酸注射液上的性能差異。
氨基酸是構(gòu)成人體所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì),是一類含有氨基 和羧基的有機(jī)化合物。大部分氨基酸通常紫外吸收較弱,直 接使用紫外方法檢測(cè)干擾較大,靈敏度低。故通常需要通過(guò) 合適的衍生試劑經(jīng)衍生化增加生色團(tuán)后,再使用紫外檢測(cè)以 提高其檢測(cè)靈敏度。目前用于氨基酸衍生化反應(yīng)的方法和試 劑很多,主要分為柱前和柱后衍生,柱前衍生又有離線和在 線衍生。衍生化試劑主要有異硫氰酸苯酯(PITC)、氨基 甲酸酯(AQC)、鄰苯二甲醛(OPA)、芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)和二硝基氟苯(DNFB)等[1-3],不同的衍生化試 劑在反應(yīng)原理、效率及穩(wěn)定性等方面不盡相同。最新公布的 2020版中國(guó)藥典(二部),根據(jù)氨基酸種類、濃度等方面的 差異,收錄了多個(gè)用于補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的平衡型復(fù)方氨基酸注射液 制劑品種,如18AA,18AA-I~18AA-IV。其中就收錄了異硫 氰酸苯酯-柱前衍生-紫外檢測(cè)法用于氨基酸含量測(cè)定[4]。
除了通過(guò)衍生法分析氨基酸的方法外,結(jié)合賽默飛的石 墨化碳柱——Hypercarb色譜柱和特色的通用型檢測(cè)器—— 電霧式檢測(cè)器(Charged Aerosol Detector,CAD),無(wú)需衍 生即可實(shí)現(xiàn)對(duì)氨基酸的直接檢測(cè)[3]。本文在賽默飛全新Van-quish Core液相色譜平臺(tái)上,開(kāi)發(fā)了基于傳統(tǒng)OPA/FMOC衍 生化試劑組合的在線針內(nèi)衍生紫外檢測(cè)方法,并與Hypercarb-CAD非衍生直接檢測(cè)方法比較,對(duì)比兩種方法在分析復(fù)方氨基 酸注射液上的性能差異。
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