小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒
小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒是采用標(biāo)準(zhǔn)化酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)研發(fā)的科研用檢測(cè)試劑盒，可精準(zhǔn)檢測(cè)小鼠生物樣本中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）濃度，廣泛應(yīng)用于PPAR功能研究、小鼠脂代謝與糖代謝調(diào)控探究、炎癥反應(yīng)機(jī)制、肥胖及代謝綜合征相關(guān)生命科學(xué)基礎(chǔ)研究場(chǎng)景。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體是核受體超家族中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，主要分為PPARα、PPARβ/δ、PPARγ三種亞型，主要分布于肝臟、脂肪組織、骨骼肌、腎臟及腸道等組織中，參與調(diào)控脂質(zhì)代謝、葡萄糖穩(wěn)態(tài)、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞分化等生理過(guò)程，其表達(dá)異常與肥胖、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化、非酒精性脂肪肝等代謝及炎癥相關(guān)疾病密切相關(guān)，相關(guān)濃度檢測(cè)對(duì)小鼠相關(guān)科研、代謝性疾病療法研發(fā)及PPAR靶向藥物篩選具有重要意義[1][2][6]。本試劑盒采用高度特異性的雙抗體夾心原理，可快速、精準(zhǔn)檢測(cè)小鼠相關(guān)樣本中的PPAR濃度，操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)，無(wú)交叉干擾，適用于科研領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究、代謝及免疫相關(guān)科研檢測(cè)，為相關(guān)科研及藥物研發(fā)提供可靠的檢測(cè)工具，各組分均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)量管控，附帶質(zhì)控證書(shū)（COA），保障檢測(cè)結(jié)果的可靠性，適配小鼠樣本常規(guī)檢測(cè)體系需求。
檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（Double Antibody Sandwich ELISA）設(shè)計(jì)而成，該方法是定量檢測(cè)核受體類轉(zhuǎn)錄因子靶標(biāo)的金標(biāo)準(zhǔn)，具有高靈敏度、強(qiáng)特異性的優(yōu)勢(shì)[3][5]。將特異性抗PPAR單克隆抗體包被于酶標(biāo)板孔內(nèi)，形成固相抗體；向板孔中加入待檢測(cè)樣本（或校準(zhǔn)品），樣本中存在的PPAR會(huì)與固相抗體特異性結(jié)合，形成抗體-抗原復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白后，加入酶標(biāo)記的該受體特異性二抗，該二抗與抗體-抗原復(fù)合物特異性結(jié)合，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)二抗的三明治復(fù)合物；再次洗滌去除未結(jié)合的酶標(biāo)二抗，加入TMB顯色底物，酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中PPAR的濃度呈正相關(guān)[3][7]；加入終止液終止反應(yīng)后，在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)校準(zhǔn)品建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算出樣本中的具體濃度，檢測(cè)范圍可達(dá)到0.156-10ng/mL，靈敏度可達(dá)pg/mL級(jí)別，滿足小鼠PPAR相關(guān)常規(guī)科研及藥物研發(fā)檢測(cè)需求，可精準(zhǔn)捕捉低濃度PPAR的表達(dá)變化，適配肝臟組織、脂肪組織、骨骼肌等樣本的微量檢測(cè)[1][2]。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 特異性高：采用高特異性的PPAR單克隆抗體，可精準(zhǔn)識(shí)別小鼠樣本中的目標(biāo)受體，與小鼠體內(nèi)其他核受體（如RXR、LXR）、雜蛋白、細(xì)胞因子及代謝相關(guān)酶類無(wú)交叉反應(yīng)，有效避免假陽(yáng)性、假陰性結(jié)果，保障檢測(cè)準(zhǔn)確性，符合嚴(yán)格的性能標(biāo)準(zhǔn)，適配相關(guān)檢測(cè)需求，可特異性識(shí)別PPAR各亞型（α、β/δ、γ），排除其他亞型及相關(guān)蛋白干擾[2][6]；
2. 靈敏度高：檢測(cè)限可達(dá)pg/mL級(jí)別，可精準(zhǔn)檢測(cè)樣本中低濃度的PPAR，滿足小鼠脂代謝異常早期、糖尿病模型初期、炎癥反應(yīng)激活早期等低表達(dá)場(chǎng)景的實(shí)驗(yàn)需求，適配這類低表達(dá)場(chǎng)景的微量檢測(cè)，助力代謝、免疫及炎癥相關(guān)科研早期探究，可精準(zhǔn)捕捉PPAR在代謝調(diào)控、炎癥反應(yīng)過(guò)程中的濃度變化[1][6]；
3. 操作簡(jiǎn)便：試劑盒包含所有檢測(cè)所需試劑（包被板、校準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、終止液、洗滌液等），無(wú)需額外配制核心試劑，步驟清晰，全程可在2-3小時(shí)內(nèi)完成，適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室及科研檢測(cè)操作，試劑外觀整潔，緩沖液為透明溶液，無(wú)沉淀或絮狀物，適配小鼠各類樣本檢測(cè)需求，貼合科研常規(guī)操作場(chǎng)景[7]；
4. 重復(fù)性好：嚴(yán)格的生產(chǎn)質(zhì)量控制體系，確保不同批次、同批次內(nèi)試劑盒的檢測(cè)結(jié)果一致性，變異系數(shù)（CV）低，保障相關(guān)實(shí)驗(yàn)及科研檢測(cè)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和穩(wěn)定性，每批次均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控驗(yàn)證，適配小鼠樣本的批量檢測(cè)，助力代謝及免疫相關(guān)規(guī)?；蒲屑皺z測(cè)[3][7]；
5. 適用范圍廣：可適配小鼠血清、血漿、肝臟組織勻漿、脂肪組織勻漿、骨骼肌勻漿、腎臟組織勻漿、腸道組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等多種樣本類型，無(wú)需復(fù)雜前處理，適配相關(guān)科研、脂代謝與糖代謝探究、炎癥機(jī)制研究及PPAR靶向藥物篩選等檢測(cè)場(chǎng)景，可用于PPAR表達(dá)調(diào)控、代謝功能評(píng)價(jià)、炎癥狀態(tài)檢測(cè)、藥物作用效果檢測(cè)等相關(guān)基礎(chǔ)研究及科研應(yīng)用，可滿足小鼠不同組織、細(xì)胞及體液樣本的多樣化檢測(cè)需求[1][2][6][7]；
6. 穩(wěn)定性強(qiáng)：試劑盒各組分經(jīng)特殊工藝處理，冷藏保存下活性穩(wěn)定，有效期長(zhǎng)，開(kāi)封后可按要求短期保存，降低試劑浪費(fèi)，且試劑批間差異小，保障檢測(cè)結(jié)果的一致性，符合體外檢測(cè)試劑相關(guān)規(guī)范，適配小鼠樣本長(zhǎng)期儲(chǔ)存、批量檢測(cè)需求，適配PPAR樣本（尤其肝臟、脂肪組織樣本）凍存、復(fù)蘇后的檢測(cè)穩(wěn)定性要求[7]。
適用樣本類型
本試劑盒適用于檢測(cè)小鼠相關(guān)生物樣本中PPAR濃度，結(jié)合小鼠樣本的采集特性及PPAR的表達(dá)分布（主要存在于肝臟、脂肪組織、骨骼肌、腎臟及腸道等組織中），具體適用樣本類型包括：小鼠血清、血漿、肝臟組織勻漿、脂肪組織勻漿、骨骼肌勻漿、腎臟組織勻漿、腸道組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液。
備注：（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)），不同樣本類型的處理流程、稀釋比例需嚴(yán)格遵循說(shuō)明書(shū)要求，避免樣本處理不當(dāng)影響檢測(cè)結(jié)果；小鼠細(xì)胞培養(yǎng)上清液、各類組織勻漿采集后需及時(shí)離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，避免干擾，采集時(shí)需確保細(xì)胞/組織處于正常生理狀態(tài)，保障PPAR含量穩(wěn)定；細(xì)胞裂解液、各類組織勻漿制備需加入對(duì)應(yīng)工作濃度的蛋白酶抑制劑，避免PPAR降解，防止靶標(biāo)受體失活；血清、血漿樣本采集后需及時(shí)離心處理，冷藏保存，盡快檢測(cè)，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致PPAR降解，適配科研樣本的采集與保存需求[7]。
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
（一）儲(chǔ)存條件
1. 未開(kāi)封試劑盒：常規(guī)儲(chǔ)存于2℃~8℃冷藏環(huán)境，避光、密封保存；嚴(yán)禁冷凍，避免低溫導(dǎo)致抗原、抗體變性，影響試劑活性，尤其避免該受體相關(guān)檢測(cè)試劑失活，保障試劑適配小鼠樣本（含肝臟、脂肪組織樣本）凍存、復(fù)蘇后的檢測(cè)需求[7]；
2. 開(kāi)封后試劑：包被板拆封后，剩余板條需密封保存于2℃~8℃，放入密封袋并加入干燥劑，避免受潮、污染；酶結(jié)合物、顯色底物等開(kāi)封后需避光冷藏，盡快使用，一般建議1周內(nèi)用完；校準(zhǔn)品復(fù)溶后建議當(dāng)天使用，未用完部分需丟棄，不可再次保存，校準(zhǔn)品凍干粉需用附帶緩沖液溶解，具體操作參考質(zhì)控證書(shū)，確保檢測(cè)結(jié)果與小鼠樣本檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)一致[7]；
3. 儲(chǔ)存環(huán)境：需保持干燥、通風(fēng)，濕度控制在40%~60%，避免陽(yáng)光直射、高溫、潮濕環(huán)境，嚴(yán)禁與腐蝕性、揮發(fā)性試劑混放，防止試劑失活或污染，保障檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性，適配常規(guī)科研實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)存條件[7]。
（二）注意事項(xiàng)
1. 試劑盒使用前需提前從冷藏環(huán)境中取出，平衡至室溫（20℃~25℃），平衡時(shí)間不少于30分鐘，避免溫度驟變影響試劑活性及檢測(cè)結(jié)果，尤其適配小鼠樣本的檢測(cè)穩(wěn)定性；同時(shí)需注意與小鼠細(xì)胞培養(yǎng)溫度（37℃常規(guī)培養(yǎng)）、肝臟/脂肪組織提取實(shí)驗(yàn)溫度做好銜接，避免樣本溫度波動(dòng)，貼合小鼠代謝及免疫科研實(shí)驗(yàn)特性[1][2]；
2. 所有試劑需嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)規(guī)定的比例稀釋、使用，不可隨意更改試劑用量或反應(yīng)時(shí)間，確保檢測(cè)條件一致；稀釋后的試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致活性下降，保障抗體與PPAR的特異性結(jié)合效率，符合ELISA實(shí)驗(yàn)的規(guī)范操作要求[3][5][6]；
3. 實(shí)驗(yàn)所用器具（EP管、吸頭、酶標(biāo)板等）需保持潔凈，一次性器具嚴(yán)禁重復(fù)使用，可重復(fù)使用器具需清洗、滅菌，避免交叉污染；酶標(biāo)板需輕拿輕放，避免板孔破損、劃痕影響檢測(cè)，小鼠樣本（尤其肝臟、脂肪組織樣本）檢測(cè)所用器具需額外注意無(wú)菌處理和低溫操作，防止細(xì)胞污染及PPAR失活，保障實(shí)驗(yàn)及檢測(cè)的準(zhǔn)確性[7]；
4. 洗滌過(guò)程需充分，每步洗滌后需將酶標(biāo)板倒置拍干，避免未結(jié)合的試劑殘留，影響顯色結(jié)果；顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行，終止液加入后需立即測(cè)定吸光度，避免顯色過(guò)度導(dǎo)致結(jié)果偏差，嚴(yán)格遵循ELISA實(shí)驗(yàn)的操作規(guī)范，確保檢測(cè)精度[3][5][7]；
5. 樣本需新鮮采集、妥善保存，避免反復(fù)凍融，若不能及時(shí)檢測(cè)，小鼠細(xì)胞裂解液、各類組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液需按說(shuō)明書(shū)要求分裝冷凍保存（-80℃），血清、血漿樣本可分裝冷凍保存（-20℃），檢測(cè)前緩慢融化并離心去除沉淀物，避免渾濁樣本用于檢測(cè)，貼合小鼠樣本及代謝、免疫相關(guān)組織樣本的凍存保存要求[7]；
6. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需做好個(gè)人防護(hù)，避免試劑接觸皮膚、黏膜，若發(fā)生接觸，需立即用大量清水沖洗；TMB顯色底物具有潛在刺激性，操作時(shí)需佩戴手套、口罩；同時(shí)注意小鼠細(xì)胞、組織及各類組織勻漿等生物樣本的生物安全防護(hù)，避免樣本泄露污染，符合科研生物安全規(guī)范[7]；
7. 試劑盒過(guò)期后嚴(yán)禁使用，所有廢棄試劑、樣本需按生物安全規(guī)范妥善處理，不可隨意丟棄；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有接觸試劑的器具需清洗、滅菌后處理；本產(chǎn)品僅用于科研及相關(guān)科研檢測(cè)用途，不適用于人體治療及臨床診斷用途，適配小鼠科研用樣本的使用權(quán)限要求[1][2][6]。
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