小鼠16α羥基雌酮試劑盒
小鼠16α羥基雌酮試劑盒是一款專門用于體外定量檢測小鼠來源生物樣本中16α羥基雌酮(16α-OH-E1)含量的專用實驗試劑組合,核心應用于基礎科研領域,尤其適配小鼠生殖內(nèi)分泌調(diào)控、乳腺疾病、卵巢功能、骨質(zhì)疏松及腫瘤相關研究。16α羥基雌酮是雌酮的重要代謝產(chǎn)物,屬于內(nèi)源性雌激素活性物質(zhì),主要由小鼠肝臟、卵巢及腎上腺組織代謝產(chǎn)生,廣泛存在于小鼠血清、血漿、卵巢組織、乳腺組織及尿液中,參與小鼠生殖發(fā)育、激素平衡調(diào)控、骨代謝等生理過程,其含量異常與小鼠卵巢功能紊亂、乳腺增生、骨質(zhì)疏松及激素依賴性腫瘤(如乳腺癌)密切相關,是相關疾病機制研究、藥物靶點篩選及內(nèi)分泌功能評估的核心檢測指標。本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)原理設計,集成了檢測所需全部試劑,具備特異性強、靈敏度高、操作便捷、結(jié)果穩(wěn)定、物種針對性強等優(yōu)勢,可快速、精準完成小鼠各類樣本中16α羥基雌酮的定量檢測,為小鼠生殖內(nèi)分泌、腫瘤相關科研實驗提供標準化、可靠的數(shù)據(jù)支撐,適配不同科研場景的檢測需求。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體一步夾心法ELISA原理,專門針對小鼠16α羥基雌酮優(yōu)化反應體系,有效規(guī)避小鼠體內(nèi)其他雌激素(如雌二醇、雌三醇)及代謝產(chǎn)物的交叉干擾,確保檢測精準度與適用性:
酶標板預先包被小鼠16α羥基雌酮特異性捕獲抗體,實驗時依次加入小鼠樣本、標準品及HRP標記的小鼠16α羥基雌酮檢測抗體,經(jīng)37℃恒溫溫育后,抗體與樣本/標準品中的16α羥基雌酮特異性結(jié)合,形成“捕獲抗體-16α羥基雌酮-檢測抗體"復合物;經(jīng)徹di
洗滌去除未結(jié)合的多余試劑(如未結(jié)合的檢測抗體、雜蛋白)后,加入TMB底物液,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色,加入終止液(硫酸溶液)后變?yōu)辄S色,顏色深淺與樣本中小鼠16α羥基雌酮的含量呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),結(jié)合標準曲線即可計算出樣本中小鼠16α羥基雌酮的具體含量。該原理適配低濃度樣本檢測,可有效避免雌激素類物質(zhì)的非特異性反應,保障檢測結(jié)果的準確性。 產(chǎn)品特點
1. 物種特異性強,無交叉干擾:采用小鼠16α羥基雌酮專屬特異性單克隆抗體,可特異性識別小鼠來源樣本中的16α羥基雌酮,有效規(guī)避大鼠、人等其他物種同源雌激素及小鼠體內(nèi)雌二醇、雌三醇、雌酮等其他雌激素代謝產(chǎn)物的干擾,同時避免樣本中雜蛋白的非特異性結(jié)合,確保檢測結(jié)果的準確性,批內(nèi)變異系數(shù)CV<5%,板間變異系數(shù)CV<8%,保障實驗數(shù)據(jù)重復性。
2. 靈敏度高,檢測范圍廣:ELISA法檢測范圍通常為10-1000pg/mL,靈敏度可達5pg/mL,可精準檢測小鼠低濃度樣本(如小鼠血清、尿液、卵巢組織勻漿)中的16α羥基雌酮,滿足不同科研樣本的檢測需求,標準曲線相關系數(shù)R2≥0.99,線性表現(xiàn)優(yōu)異,適配小鼠生理及病理狀態(tài)下的含量變化檢測。
3. 操作便捷,效率高效:試劑盒包含檢測所需全部試劑(預包被酶標板、凍干標準品、樣本xi釋液、檢測抗體-HRP、濃縮洗滌液、TMB底物液、終止液、封板膜等),無需額外配制核心試劑,實驗流程簡化,全程可在1-2小時內(nèi)完成,適配96孔板高通量設計,單次可檢測96個樣本,大幅提升實驗效率,新手也可輕松操作。
4. 穩(wěn)定性好,保質(zhì)期長:試劑經(jīng)嚴格質(zhì)檢與工藝優(yōu)化,凍干標準品、特異性抗體及底物活性穩(wěn)定,未開封試劑盒按要求儲存可穩(wěn)定保存,稀釋后的試劑可短期冷藏使用,避免反復凍融導致的活性下降,確保不同批次實驗結(jié)果的一致性,保障實驗重復性;標準品由無水乙醇配制,密封性好,可有效防止揮發(fā),進一步提升試劑穩(wěn)定性。
5. 適配性廣,場景多元:專門適配小鼠樣本檢測,兼容小鼠血清、血漿(EDTA或肝素抗凝)、組織勻漿(卵巢、乳腺、肝臟、子宮等)、尿液、細胞培養(yǎng)液等多種樣本類型,廣泛應用于小鼠生殖內(nèi)分泌調(diào)控、卵巢功能研究、乳腺疾病、骨質(zhì)疏松、激素依賴性腫瘤等相關科研領域,適配基礎科研、藥物靶點篩選、內(nèi)分泌功能評估等實驗場景。
6. 安全便捷,風險可控:優(yōu)化試劑配方,無需氯仿、二氯甲烷等有毒有機溶劑,操作過程更安全,同時配套詳細說明書,明確操作步驟、樣本處理及注意事項,降低實驗失誤概率,保障實驗安全與順利進行;試劑組分均經(jīng)過無菌檢測,可有效避免污染風險。
適用樣本類型
本試劑盒專門適配小鼠來源樣本,可滿足小鼠生殖內(nèi)分泌、腫瘤相關科研實驗的多樣化檢測需求,具體適用樣本包括:小鼠血清、血漿(EDTA或肝素抗凝)、組織勻漿(卵巢組織、乳腺組織、肝臟組織、子宮組織等)、尿液、細胞培養(yǎng)液。其中,組織勻漿需用預冷PBS(含蛋白酶抑制劑更佳)制備,低溫離心提?。荒蛞簶颖拘栊迈r采集,避免長時間放置導致雌激素降解,采集后低溫離心去除雜質(zhì);血清/血漿樣本采集后需低溫離心處理,避免溶血,新鮮樣本優(yōu)先檢測,若無法立即檢測需冷凍保存。(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 未開封試劑盒:需置于2-8℃避光密封保存,避免陽光直射、溫度波動及潮濕環(huán)境,嚴禁冷凍,未開封試劑盒有效期通常為12個月,具體以說明書標注為準。
2. 組分儲存:凍干標準品、小鼠16α羥基雌酮特異性抗體、TMB底物液等核心組分需置于-20℃避光保存,避免反復凍融(≤3次),防止活性喪失;濃縮洗滌液、樣本xi釋液可在2-8℃冷藏保存;標準品及抗體母液稀釋后需存放于4℃,切勿放-20℃低溫處,以免降低效價。
3. 稀釋后試劑:稀釋后的洗滌液、樣本xi釋液可在4℃冷藏保存,1周內(nèi)用完;稀釋后的標準品、抗體需現(xiàn)配現(xiàn)用,未用完的可短期冷藏,避免反復凍融及光照;樣本xi釋液需注意保質(zhì)期,夏季即使冷藏也需避免批量配制過多,防止變質(zhì)。
4. 運輸條件:運輸時采用凝膠冷藏包,確保試劑溫度穩(wěn)定在2-8℃,避免劇烈震蕩、暴曬及ji端溫度,防止試劑失效,尤其注意保護抗體及底物,避免光照直射和溫度驟變。
(二)注意事項
1. 實驗全程需嚴格遵循無菌操作規(guī)范,實驗器具需提前高壓滅菌處理,加樣時使用無菌槍頭,避免試劑及樣本污染,尤其是尿液和組織勻漿樣本,污染會導致檢測結(jié)果偏高;實驗臺面需保持清潔,避免試劑交叉污染。
2. 試劑使用前需從冰箱取出,置于室溫(25℃左右)平衡30分鐘以上,避免溫差導致冷凝水干擾實驗;試劑配制及加樣時動作輕柔,避免劇烈震蕩,防止試劑失效或樣本中16α羥基雌酮變性,抗體與樣本孵育時避免劇烈晃動,確??乖贵w充分結(jié)合。
3. 孵育及顯色過程需嚴格控制溫度和時間,尤其是顯色反應需避光進行,避免光照影響顯色效果;終止反應后需在10分鐘內(nèi)完成讀數(shù),防止顏色消退,確保檢測數(shù)據(jù)穩(wěn)定,同時避免過度孵育導致非特異性顯色。
4. 不同批次的試劑不可混用,試劑盒配套試劑需單獨使用,避免與其他試劑盒試劑交叉使用,防止干擾實驗結(jié)果;實驗結(jié)束后,廢棄試劑及耗材需按生物安全規(guī)范妥善處理,避免污染環(huán)境;含終止液的廢液需單獨收集處理,避免腐蝕設備。
5. 操作含硫酸的終止液時,需佩戴手套、口罩、護目鏡,避免皮膚接觸及吸入,防止刺激傷害;實驗臺面需保持清潔,避免試劑灑落,若不慎接觸皮膚,需立即用大量清水沖洗;試劑瓶蓋需及時蓋緊,防止揮發(fā)和污染。
6. 若樣本中小鼠16α羥基雌酮含量超出檢測范圍,需適當稀釋后重新檢測,不可直接檢測,以免導致結(jié)果偏差;檢測過程中可設置陽性對照和空白對照,確保實驗體系正常,陽性對照孔吸光度需落在標準曲線范圍內(nèi),否則提示實驗失效;樣本需新鮮采集處理,避免長時間放置導致16α羥基雌酮降解,影響檢測結(jié)果。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。