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更新時間:2025-11-24 12:13:34瀏覽次數(shù):645次
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CaSki人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞是從CaSki宮頸癌母細(xì)胞系中篩選并純化的高轉(zhuǎn)移潛能亞系,源自宮頸癌腸轉(zhuǎn)移臨床樣本的體外培養(yǎng)模型。其因穩(wěn)定保留宮頸癌向腸道轉(zhuǎn)移的核心生物學(xué)特征、體內(nèi)外轉(zhuǎn)移能力明確,成為研究宮頸癌腸轉(zhuǎn)移機(jī)制、微環(huán)境適配及抗轉(zhuǎn)移藥物研發(fā)的專屬工具,為破解宮頸癌腸轉(zhuǎn)移這一臨床難題提供了貼近真實轉(zhuǎn)移場景的實驗支撐。
從生物學(xué)特性來看,該細(xì)胞在保留宮頸鱗癌細(xì)胞基本形態(tài)的基礎(chǔ)上,呈現(xiàn)出轉(zhuǎn)移細(xì)胞te有的表型特征:貼壁生長時呈紡錘形為主的不規(guī)則形態(tài),細(xì)胞極性更紊亂,胞質(zhì)邊緣出現(xiàn)明顯偽足結(jié)構(gòu)以增強(qiáng)運動能力,細(xì)胞核大而深染,核仁增多且核分裂象活躍,惡性特征較母系更顯著。增殖活性較母細(xì)胞進(jìn)一步提升,傳代周期縮短至1.5-2天,無接觸抑制且易形成懸浮生長的細(xì)胞團(tuán)。除表達(dá)細(xì)胞角蛋白17(CK17)、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC-Ag)等宮頸癌標(biāo)志物外,高表達(dá)腸轉(zhuǎn)移相關(guān)分子,如整合素β1、基質(zhì)金屬蛋白酶-7(MMP-7)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),經(jīng)檢測無微生物污染,遺傳背景穩(wěn)定,在體外可穩(wěn)定復(fù)現(xiàn)宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞的侵襲表型。
該細(xì)胞的培養(yǎng)條件需兼顧腫瘤細(xì)胞特性與轉(zhuǎn)移表型維持,常規(guī)采用含12%-15%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基,添加5ng/mL表皮生長因子(EGF)以增強(qiáng)轉(zhuǎn)移相關(guān)信號活性,培養(yǎng)環(huán)境維持37℃恒溫、5%CO?濃度及95%相對濕度。胎牛血清提供的營養(yǎng)成分與生長因子,為細(xì)胞高增殖和高轉(zhuǎn)移活性提供能量;RPMI-1640培養(yǎng)基的緩沖體系適配其代謝需求,EGF可激活細(xì)胞遷移相關(guān)信號通路。傳代操作時,用無菌PBS緩沖液輕柔清洗2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育2-3分鐘,待細(xì)胞脫壁后用含血清培養(yǎng)基終止消化,吹打為單細(xì)胞懸液后按1:5-1:10比例傳代,需避免過度消化破壞細(xì)胞偽足結(jié)構(gòu),影響轉(zhuǎn)移能力評估。
在研究應(yīng)用領(lǐng)域,該細(xì)胞系的價值聚焦于宮頸癌腸轉(zhuǎn)移的核心科學(xué)問題。在轉(zhuǎn)移機(jī)制研究中,可用于解析宮頸癌細(xì)胞穿透腸黏膜屏障的分子過程,例如分析MMP-7對腸上皮基底膜的降解作用,探究整合素β1介導(dǎo)的細(xì)胞與腸黏膜基質(zhì)的黏附機(jī)制,明確“上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)"在轉(zhuǎn)移過程中的調(diào)控作用,為挖掘轉(zhuǎn)移特異性靶點提供依據(jù)。在微環(huán)境適配研究中,通過構(gòu)建“宮頸癌-腸上皮細(xì)胞"共培養(yǎng)模型,模擬腫瘤細(xì)胞與腸黏膜微環(huán)境的相互作用,揭示腸組織分泌的細(xì)胞因子對腫瘤細(xì)胞定植的促進(jìn)機(jī)制。
此外,該細(xì)胞系是抗宮頸癌腸轉(zhuǎn)移藥物篩選的核心模型。體外可通過Transwell遷移實驗、腸黏膜模擬屏障穿透實驗,檢測藥物對細(xì)胞遷移、侵襲能力的抑制效果;體內(nèi)可構(gòu)建裸鼠宮頸癌腸轉(zhuǎn)移模型,評估藥物對轉(zhuǎn)移灶形成的阻斷作用,為開發(fā)針對性抗轉(zhuǎn)移藥物提供數(shù)據(jù)支撐。使用該細(xì)胞需注意:一是傳代控制在50代以內(nèi),每10代通過侵襲實驗驗證轉(zhuǎn)移能力穩(wěn)定性;二是培養(yǎng)時避免頻繁晃動培養(yǎng)皿,防止細(xì)胞偽足結(jié)構(gòu)破壞;三是實驗中需設(shè)置母系CaSki細(xì)胞作為對照,明確腸轉(zhuǎn)移亞系的特異性表型。作為專屬研究工具,該細(xì)胞為宮頸癌轉(zhuǎn)移精準(zhǔn)研究提供了不可替代的實驗基礎(chǔ)。
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