人晚期氧化蛋白產(chǎn)物試劑盒用于定量檢測AOPP濃度。AOPP是氧化應激標志物,在腎病、糖尿病等疾病中水平升高。采用ELISA法或比色法,適用于血清、血漿樣本,用于評估氧化應激損傷,僅供科研使用。
人晚期氧化蛋白產(chǎn)物試劑盒
人晚期氧化蛋白產(chǎn)物試劑盒(Human Advanced Oxidation Protein Products Kit,AOPP Kit),是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測試劑盒,可特異性檢測人血清、血漿、組織勻漿及細胞培養(yǎng)上清中晚期氧化蛋白產(chǎn)物(Advanced Oxidation Protein Products,AOPP)的含量,經(jīng)特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認,無交叉反應,檢測結果準確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)是蛋白質在氧化應激條件下發(fā)生氧化修飾形成的終末產(chǎn)物,主要由中性粒細胞髓過氧化物酶催化產(chǎn)生,其異常蓄積會加重氧化應激損傷,與糖尿病及其并發(fā)癥、慢性腎病、心血管疾病、炎癥反應、衰老及自身免疫性疾病密切相關,是評估機體氧化應激水平、相關疾病輔助診斷、病情監(jiān)測及分子機制研究的重要指標。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速,可精準定量樣本中AOPP含量,廣泛應用于臨床檢驗(氧化應激相關疾病篩查)、老年病學研究、抗氧化藥物篩選、炎癥研究、分子生物學科研等領域,是臨床、科研領域的核心氧化應激相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)的抗原抗體特異性結合特性,結合氧化應激指標檢測的精準需求設計:試劑盒預先將AOPP特異性抗體包被于酶標板上,加入待檢測樣本(血清、血漿等)后,樣本中的AOPP會與酶標板上的抗體特異性結合,形成抗原-抗體復合物;洗滌去除未結合的雜蛋白、氧化雜質及未修飾蛋白質后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的AOPP二抗,與復合物特異性結合,形成“包被抗體-AOPP-酶標二抗"的三明治結構;再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應,顯色強度與樣本中AOPP的含量呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),對照標準曲線即可計算出樣本中AOPP的具體含量。檢測流程規(guī)范:樣本采集后需及時處理(血清/血漿離心分離、細胞上清收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標板平衡至室溫后,依次加入標準品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應,10分鐘內用酶標儀測定OD值,計算檢測結果,參考標準區(qū)間判斷樣本中AOPP含量是否異常,進而評估機體氧化應激水平、相關疾病進展或預后。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品針對人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)檢測需求優(yōu)化制備,核心特點如下:1. 特異性強:采用高特異性AOPP單克隆抗體,可特異性結合樣本中的AOPP,不與未氧化蛋白質、脂質過氧化物、其他氧化中間產(chǎn)物及炎癥因子發(fā)生交叉反應,檢測特異性>99%,確保檢測結果精準,有效規(guī)避氧化應激檢測中的干擾因素;2. 質控嚴格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩(wěn)定性檢測,附完整QC報告,確保批內變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測靈敏度可達0.1μmol/L,符合臨床檢測與科研標準;3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測試劑(包被酶標板、AOPP標準品、酶標二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡單,全程可在2.5小時內完成,適配常規(guī)實驗室操作,新手易上手;4. 樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿四種樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復雜預處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配氧化應激、炎癥、衰老及相關疾病多場景樣本;5. 適配場景廣:可用于糖尿病及并發(fā)癥、慢性腎病、心血管疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測,機體氧化應激水平評估,炎癥反應、衰老機制研究,抗氧化、抗炎藥物篩選,以及臨床檢驗、老年病學、免疫學、分子生物學實驗室的常規(guī)檢測,適配臨床與科研多場景;6. 儲存運輸便捷:試劑盒采用密封包裝,2-8℃冷藏運輸,2-8℃避光保存可穩(wěn)定存放6個月,避免反復凍融,試劑活性穩(wěn)定,適配長期儲存與批量運輸需求。
適用樣本類型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測與科研實驗,適用樣本類型及實驗場景包括:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會干擾檢測結果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人細胞培養(yǎng)上清樣本(收集對數(shù)期細胞上清,離心去除雜質)、人組織勻漿樣本(病變組織或正常組織破碎后離心取上清);實驗場景涵蓋糖尿病及并發(fā)癥、慢性腎病、心血管疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測,機體氧化應激水平評估,炎癥反應、衰老機制研究,抗氧化、抗炎藥物篩選與效果評估,以及臨床檢驗、老年病學、免疫學、分子生物學實驗室的常規(guī)檢測。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標板,酶標儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿可根據(jù)濃度適當調整),標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6μmol/L,參考區(qū)間為0.3~1.8μmol/L(具體以說明書為準);檢測完成后可通過標準曲線計算樣本中AOPP含量,結合臨床癥狀或實驗目的評估機體氧化應激水平、相關疾病進展或預后。
備注:(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存,嚴禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失,影響檢測結果準確性;2. 標準品、酶標二抗、底物液等試劑開封后,需密封冷藏保存,1個月內用完,底物液需避光保存,避免光照導致顯色異常,AOPP標準品避免反復凍融,防止其結構破壞影響檢測,尤其避免與強氧化劑、還原劑接觸;3. 樣本采集后需及時處理,血清/血漿樣本離心后冷藏(2-8℃)保存,24小時內完成檢測;細胞上清、組織勻漿樣本采集后冷藏或-20℃短期保存,48小時內完成檢測,避免樣本變質、AOPP降解影響檢測結果;4. 所有試劑儲存期間避免劇烈震蕩,稀釋后的試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,密封冷藏保存,盡快使用,避免試劑失效導致檢測誤差,尤其稀釋后的酶標二抗需在24小時內用完,檢測環(huán)境需保持清潔,避免氧化雜質污染。
(二)注意事項
1. 本產(chǎn)品僅供體外診斷、科研檢測使用,嚴禁用于人體注射或臨床治療,操作時嚴格遵循無菌操作規(guī)范,佩戴PPE,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜,防止污染與感染,同時避免試劑接觸強氧化劑、還原劑及強酸強堿類物質;2. 樣本采集需遵循無菌原則,血清樣本避免溶血,組織勻漿樣本需充分破碎離心,去除組織碎片與氧化雜質,細胞上清需離心去除細胞雜質,采集后及時送檢,避免放置過久變質或AOPP降解;3. 檢測過程中嚴格按照試劑盒說明書操作,控制孵育溫度(37℃)與時間,洗滌步驟需充分,避免未結合試劑、氧化雜質殘留,導致顯色異常、檢測結果偏差,孵育期間避免酶標板劇烈晃動,同時避免檢測環(huán)境受到氧化雜質污染;4. 底物液為TMB顯色劑,具有潛在刺激性,操作時需佩戴手套,若不慎接觸皮膚或黏膜,需立即用大量清水沖洗;終止液為酸性溶液,避免與底物液提前接觸,防止提前終止顯色,避免接觸衣物造成腐蝕;5. 檢測完成后,酶標板、剩余試劑及樣本需按生物安全規(guī)范處理,高壓滅菌后丟棄,避免樣本與試劑殘留污染環(huán)境,尤其含AOPP的臨床樣本及炎癥樣本需徹di滅活;6. 若檢測過程中出現(xiàn)顯色異常、標準曲線線性不佳等問題,需檢查試劑儲存條件、孵育時間、樣本處理情況及是否存在污染,可聯(lián)系廠家獲取技術支持;7. 嚴格按說明書操作,確保檢測結果的可靠性,適配AOPP相關氧化應激評估、疾病診斷及藥物篩選實驗。
訂購信息
如果您對上述產(chǎn)品感興趣,可通過“聯(lián)系我們"頁面提交需求,我們將及時回復。
以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。