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人纖調(diào)蛋白試劑盒用于定量檢測(cè)纖調(diào)蛋白(FMOD)濃度。FMOD參與膠原組裝和組織修復(fù)。采用ELISA法,適用于血清、細(xì)胞上清等樣本,用于組織纖維化、腫瘤等疾病研究,僅供科研使用。
人纖調(diào)蛋白試劑盒
人纖調(diào)蛋白試劑盒(Human Fibromodulin Kit,F(xiàn)mod Kit),是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒,可特異性檢測(cè)人血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清中纖調(diào)蛋白(Fibromodulin,F(xiàn)mod)的含量,經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn),無交叉反應(yīng),檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。纖調(diào)蛋白(Fmod)是一種富含亮an酸的小分子蛋白聚糖,主要表達(dá)于結(jié)締組織(如皮膚、軟骨、肌腱、肺組織)中,可調(diào)控膠原纖維的組裝與穩(wěn)定,參與組織修復(fù)、纖維化進(jìn)程及炎癥反應(yīng),其異常表達(dá)與纖維化疾?。ㄈ绶卫w維化、肝纖維化、腎纖維化)、軟骨損傷、皮膚病及腫瘤相關(guān)纖維化密切相關(guān),是纖維化疾病輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)估及結(jié)締組織機(jī)制研究的重要指標(biāo)。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速,可精準(zhǔn)定量樣本中Fmod含量,廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)(纖維化疾病篩查)、病理學(xué)科研、抗纖維化藥物篩選、組織修復(fù)研究等領(lǐng)域,是臨床、科研領(lǐng)域的核心結(jié)締組織相關(guān)檢測(cè)工具。
檢測(cè)原理
本試劑盒的核心檢測(cè)原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦人纖調(diào)蛋白(Fmod)的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合結(jié)締組織及纖維化檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì):試劑盒預(yù)先將Fmod特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測(cè)樣本(血清、血漿等)后,樣本中的Fmod會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、結(jié)締組織碎片及其他蛋白聚糖雜質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Fmod二抗,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“包被抗體-Fmod-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中Fmod的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中Fmod的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范:樣本采集后需及時(shí)處理(血清/血漿離心分離、細(xì)胞上清收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,計(jì)算檢測(cè)結(jié)果,參考標(biāo)準(zhǔn)區(qū)間判斷樣本中Fmod含量是否異常,進(jìn)而輔助纖維化疾病診斷、評(píng)估病情進(jìn)展及治療效果。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對(duì)人纖調(diào)蛋白(Fmod)檢測(cè)需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:1. 特異性強(qiáng):采用高特異性Fmod單克隆抗體,可特異性結(jié)合樣本中的Fmod,不與其他蛋白聚糖(如 decorin、biglycan)、膠原蛋白及雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),檢測(cè)特異性>99%,確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避結(jié)締組織檢測(cè)中的干擾因素;2. 質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè),附完整QC報(bào)告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL,符合臨床檢測(cè)與科研標(biāo)準(zhǔn);3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測(cè)試劑(包被酶標(biāo)板、Fmod標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡(jiǎn)單,全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成,適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作,新手易上手;4. 樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿四種核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè),適配纖維化疾病、軟骨損傷及科研多場(chǎng)景樣本;5. 適配場(chǎng)景廣:可用于肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化等纖維化疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),軟骨損傷、皮膚纖維化的評(píng)估,結(jié)締組織修復(fù)機(jī)制研究,抗纖維化、抗炎藥物篩選,以及臨床檢驗(yàn)、病理學(xué)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè),適配臨床與科研多場(chǎng)景;6. 儲(chǔ)存運(yùn)輸便捷:試劑盒采用密封包裝,2-8℃冷藏運(yùn)輸,2-8℃避光保存可穩(wěn)定存放6個(gè)月,避免反復(fù)凍融,試劑活性穩(wěn)定,適配長(zhǎng)期儲(chǔ)存與批量運(yùn)輸需求。
適用樣本類型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn),適用樣本類型及實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景包括:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本(成纖維細(xì)胞、結(jié)締組織細(xì)胞對(duì)數(shù)期上清,離心去除雜質(zhì))、人組織勻漿樣本(肺組織、肝組織、軟骨組織等破碎后離心取上清);實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化、皮膚纖維化等疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),軟骨損傷、肌腱修復(fù)的評(píng)估,結(jié)締組織組裝與穩(wěn)定機(jī)制研究,抗纖維化、抗炎藥物篩選與效果評(píng)估,以及臨床檢驗(yàn)、病理學(xué)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀(波長(zhǎng)450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間為0.3~1.5ng/mL(具體以說明書為準(zhǔn));檢測(cè)完成后可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中Fmod含量,結(jié)合臨床癥狀或?qū)嶒?yàn)?zāi)康妮o助纖維化疾病診斷、評(píng)估病情進(jìn)展。
備注:(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書)
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
(一)儲(chǔ)存條件
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失,影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性;2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液等試劑開封后,需密封冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)用完,底物液需避光保存,避免光照導(dǎo)致顯色異常,F(xiàn)mod標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其結(jié)構(gòu)破壞影響檢測(cè),尤其避免與強(qiáng)變性劑、蛋白酶接觸;3. 樣本采集后需及時(shí)處理,血清/血漿樣本離心后冷藏(2-8℃)保存,24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè);細(xì)胞上清、組織勻漿樣本采集后冷藏或-20℃短期保存,48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),避免樣本變質(zhì)、Fmod被蛋白酶降解影響檢測(cè)結(jié)果;4. 所有試劑儲(chǔ)存期間避免劇烈震蕩,稀釋后的試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,密封冷藏保存,盡快使用,避免試劑失效導(dǎo)致檢測(cè)誤差,尤其稀釋后的酶標(biāo)二抗需在24小時(shí)內(nèi)用完,檢測(cè)環(huán)境需保持清潔,避免蛋白酶、結(jié)締組織雜質(zhì)污染。
(二)注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅供體外診斷、科研檢測(cè)使用,嚴(yán)禁用于人體注射或臨床治療,操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,佩戴PPE,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜,防止污染與感染,同時(shí)避免試劑接觸強(qiáng)變性劑、蛋白酶及強(qiáng)酸強(qiáng)堿類物質(zhì);2. 樣本采集需遵循無菌原則,血清樣本避免溶血,組織勻漿樣本(尤其肺、肝、軟骨組織)需充分破碎離心,去除組織碎片與蛋白酶雜質(zhì),細(xì)胞上清需離心去除細(xì)胞雜質(zhì),采集后及時(shí)送檢,避免放置過久變質(zhì)或Fmod降解;3. 檢測(cè)過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作,控制孵育溫度(37℃)與時(shí)間,洗滌步驟需充分,避免未結(jié)合試劑、蛋白酶殘留,導(dǎo)致顯色異常、檢測(cè)結(jié)果偏差,孵育期間避免酶標(biāo)板劇烈晃動(dòng),同時(shí)避免檢測(cè)環(huán)境受到蛋白酶污染;4. 底物液為TMB顯色劑,具有潛在刺激性,操作時(shí)需佩戴手套,若不慎接觸皮膚或黏膜,需立即用大量清水沖洗;終止液為酸性溶液,避免與底物液提前接觸,防止提前終止顯色,避免接觸衣物造成腐蝕;5. 檢測(cè)完成后,酶標(biāo)板、剩余試劑及樣本需按生物安全規(guī)范處理,高壓滅菌后丟棄,避免樣本與試劑殘留污染環(huán)境,尤其含F(xiàn)mod的纖維化組織樣本、臨床樣本需徹di滅活;6. 若檢測(cè)過程中出現(xiàn)顯色異常、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳等問題,需檢查試劑儲(chǔ)存條件、孵育時(shí)間、樣本處理情況及是否存在污染,可聯(lián)系廠家獲取技術(shù)支持;7. 嚴(yán)格按說明書操作,確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性,適配Fmod相關(guān)纖維化疾病診斷、組織修復(fù)評(píng)估及藥物篩選實(shí)驗(yàn),檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀綜合判斷。
訂購信息
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