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人纖維介素蛋白試劑盒用于定量檢測(cè)FGL2濃度。FGL2參與凝血和免疫調(diào)節(jié)，與移植排斥、腫瘤相關(guān)。采用ELISA法檢測(cè)血清等樣本，用于凝血及免疫研究，僅供科研使用。
人纖維介素蛋白試劑盒
人纖維介素蛋白試劑盒（Human Fibroleukin Kit，F(xiàn)GL2 Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒，可特異性檢測(cè)人血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清中纖維介素蛋白（Fibroleukin，F(xiàn)GL2）的含量，經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，無(wú)交叉反應(yīng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，無(wú)試劑降解、雜菌污染等問(wèn)題。纖維介素蛋白（FGL2）是一種具有免疫調(diào)節(jié)與凝血調(diào)控雙重功能的糖蛋白，主要由活化的T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌，可參與免疫耐受調(diào)控、炎癥反應(yīng)介導(dǎo)，同時(shí)具有凝xue酶原酶活性，可促進(jìn)凝血過(guò)程，其異常表達(dá)與自身免疫性疾病、血栓性疾病、炎癥性疾病及腫瘤密切相關(guān)，是免疫功能評(píng)估、相關(guān)疾病輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)及免疫-凝血交叉機(jī)制研究的重要指標(biāo)。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速，可精準(zhǔn)定量樣本中FGL2含量，廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)（免疫與凝血相關(guān)疾病篩查）、免疫學(xué)科研、抗炎/抗血栓藥物篩選、自身免疫病研究等領(lǐng)域，是臨床、科研領(lǐng)域的核心免疫-凝血交叉相關(guān)檢測(cè)工具。
檢測(cè)原理
本試劑盒的核心檢測(cè)原理，基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），聚焦人纖維介素蛋白（FGL2）的抗原抗體特異性結(jié)合特性，結(jié)合免疫與凝血相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì)：試劑盒預(yù)先將FGL2特異性抗體包被于酶標(biāo)板上，加入待檢測(cè)樣本（血清、血漿等）后，樣本中的FGL2會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、免疫細(xì)胞碎片、凝xue因子及其他無(wú)關(guān)蛋白后，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的FGL2二抗，與復(fù)合物特異性結(jié)合，形成“包被抗體-FGL2-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu)；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中FGL2的含量呈正相關(guān)，通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中FGL2的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范：樣本采集后需及時(shí)處理（血清/血漿離心分離、細(xì)胞上清收集、組織勻漿破碎離心），按照試劑盒說(shuō)明書(shū)稀釋樣本；酶標(biāo)板平衡至室溫后，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應(yīng)，10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，計(jì)算檢測(cè)結(jié)果，參考標(biāo)準(zhǔn)區(qū)間判斷樣本中FGL2含量是否異常，進(jìn)而評(píng)估免疫與凝血功能、輔助相關(guān)疾病診斷及治療效果。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對(duì)人纖維介素蛋白（FGL2）檢測(cè)需求優(yōu)化制備，核心特點(diǎn)如下：1. 特異性強(qiáng)：采用高特異性FGL2單克隆抗體，可特異性結(jié)合樣本中的FGL2，不與纖維蛋白、凝xue酶、其他免疫調(diào)節(jié)蛋白及雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，檢測(cè)特異性＞99%，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)，有效規(guī)避免疫與凝血相關(guān)檢測(cè)中的干擾因素；2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次試劑盒均通過(guò)靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè)，附完整QC報(bào)告，確保批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%、批間變異系數(shù)（CV）＜10%，檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，符合臨床檢測(cè)與科研標(biāo)準(zhǔn)；3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測(cè)試劑（包被酶標(biāo)板、FGL2標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無(wú)需額外配制核心試劑，步驟簡(jiǎn)單，全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成，適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作，新手易上手；4. 樣本兼容廣：可適配人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿四種核心樣本類(lèi)型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無(wú)需復(fù)雜預(yù)處理，僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè)，適配自身免疫病、血栓性疾病及科研多場(chǎng)景樣本；5. 適配場(chǎng)景廣：可用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病，深靜脈血栓、肺栓塞等血栓性疾病，炎癥性腸病等炎癥性疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè)，免疫-凝血交叉機(jī)制研究，抗炎、抗血栓、免疫調(diào)節(jié)藥物篩選，以及臨床檢驗(yàn)、免疫學(xué)、血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)，適配臨床與科研多場(chǎng)景；6. 儲(chǔ)存運(yùn)輸便捷：試劑盒采用密封包裝，2-8℃冷藏運(yùn)輸，2-8℃避光保存可穩(wěn)定存放6個(gè)月，避免反復(fù)凍融，試劑活性穩(wěn)定，適配長(zhǎng)期儲(chǔ)存與批量運(yùn)輸需求。
適用樣本類(lèi)型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn)，適用樣本類(lèi)型及實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景包括：人血清樣本（靜脈采血后離心分離，避免溶血，溶血會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果）、人血漿樣本（EDTA或肝素抗凝，離心分離）、人細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本（T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)數(shù)期上清，離心去除雜質(zhì)）、人組織勻漿樣本（免疫器官、血管組織、炎癥組織等破碎后離心取上清）；實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病，深靜脈血栓、肺栓塞、腦梗死等血栓性疾病，炎癥性腸病、慢性肝炎等炎癥性疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè)，免疫耐受、免疫-凝血交叉機(jī)制研究，抗炎、抗血栓、免疫調(diào)節(jié)藥物篩選與效果評(píng)估，以及臨床檢驗(yàn)、免疫學(xué)、血液學(xué)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系：使用試劑盒配套酶標(biāo)板，酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)450nm），按照說(shuō)明書(shū)步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整），標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL（具體以說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)）；檢測(cè)完成后可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中FGL2含量，結(jié)合臨床癥狀或?qū)嶒?yàn)?zāi)康脑u(píng)估免疫與凝血功能、輔助相關(guān)疾病診斷。
備注：（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)）
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
（一）儲(chǔ)存條件
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存，嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失，影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性；2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液等試劑開(kāi)封后，需密封冷藏保存，1個(gè)月內(nèi)用完，底物液需避光保存，避免光照導(dǎo)致顯色異常，F(xiàn)GL2標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融，防止其結(jié)構(gòu)破壞影響檢測(cè)，尤其避免與強(qiáng)變性劑、蛋白酶接觸；3. 樣本采集后需及時(shí)處理，血清/血漿樣本離心后冷藏（2-8℃）保存，24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)；細(xì)胞上清、組織勻漿樣本采集后冷藏或-20℃短期保存，48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，避免樣本變質(zhì)、FGL2被蛋白酶降解影響檢測(cè)結(jié)果；4. 所有試劑儲(chǔ)存期間避免劇烈震蕩，稀釋后的試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用，密封冷藏保存，盡快使用，避免試劑失效導(dǎo)致檢測(cè)誤差，尤其稀釋后的酶標(biāo)二抗需在24小時(shí)內(nèi)用完，檢測(cè)環(huán)境需保持清潔，避免蛋白酶、免疫細(xì)胞碎片污染。
（二）注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅供體外診斷、科研檢測(cè)使用，嚴(yán)禁用于人體注射或臨床治療，操作時(shí)嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，佩戴PPE，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜，防止污染與感染，同時(shí)避免試劑接觸強(qiáng)變性劑、蛋白酶及強(qiáng)酸強(qiáng)堿類(lèi)物質(zhì)；2. 樣本采集需遵循無(wú)菌原則，血清樣本避免溶血，組織勻漿樣本（尤其免疫器官、血管組織、炎癥組織）需充分破碎離心，去除組織碎片與蛋白酶雜質(zhì)，細(xì)胞上清需離心去除細(xì)胞雜質(zhì)，采集后及時(shí)送檢，避免放置過(guò)久變質(zhì)或FGL2降解；3. 檢測(cè)過(guò)程中嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，控制孵育溫度（37℃）與時(shí)間，洗滌步驟需充分，避免未結(jié)合試劑、蛋白酶殘留，導(dǎo)致顯色異常、檢測(cè)結(jié)果偏差，孵育期間避免酶標(biāo)板劇烈晃動(dòng)，同時(shí)避免檢測(cè)環(huán)境受到蛋白酶污染；4. 底物液為T(mén)MB顯色劑，具有潛在刺激性，操作時(shí)需佩戴手套，若不慎接觸皮膚或黏膜，需立即用大量清水沖洗；終止液為酸性溶液，避免與底物液提前接觸，防止提前終止顯色，避免接觸衣物造成腐蝕；5. 檢測(cè)完成后，酶標(biāo)板、剩余試劑及樣本需按生物安全規(guī)范處理，高壓滅菌后丟棄，避免樣本與試劑殘留污染環(huán)境，尤其含F(xiàn)GL2的免疫相關(guān)、凝血相關(guān)臨床樣本、炎癥樣本需徹di滅活；6. 若檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)顯色異常、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳等問(wèn)題，需檢查試劑儲(chǔ)存條件、孵育時(shí)間、樣本處理情況及是否存在污染，可聯(lián)系廠家獲取技術(shù)支持；7. 嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性，適配FGL2相關(guān)免疫與凝血功能評(píng)估、自身免疫病及血栓疾病診斷及藥物篩選實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀綜合判斷。
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