AdvanceBio丨從分析到純化,推進寡核苷酸工作流程
近年來,適配體、向導 RNA、小干擾 RNA、反義寡核苷酸等合成寡核苷酸已成為生命科學和診斷研究的關注焦點,其中許多寡核苷酸在病毒感染、癌癥治療和其他多種治療應用中表現(xiàn)出潛力。但必須對合成工藝和降解過程所產生的雜質加以監(jiān)測、鑒定和去除。目前,開發(fā)和生產核酸類治療藥物面臨的關鍵挑戰(zhàn)是需要建立能夠分離和鑒定雜質的分析方法,以及可獲得高質量和高目標序列產率的純化方法。
AdvanceBio:寡核苷酸分析與純化創(chuàng)新解決方案
從分析級到半制備級和制備級應用,Agilent AdvanceBio 寡核苷酸色譜柱、軟件和儀器都可以無縫配合,大幅減少方法優(yōu)化和停機時間。無論您使用的是 LC/MS 還是 UV 分析,AdvanceBio 寡核苷酸系列可擴展的色譜柱填料以及配套的儀器和軟件平臺都可以推進您的寡核苷酸分析工作流程,實現(xiàn)更出色的表征和純化。

從半制備到制備:輕松滿足各種純化需求
AdvanceBio 10mm 內徑半制備柱(2.7/4μm 粒徑),搭配分析型液相色譜儀即可完成半制備純化與餾分分析,其柱加熱功能還能提升分離度與回收率。

圖 1. 半制備柱上進樣 160 µL(柱上進樣 3.2 mg)獲得的色譜圖(UV 260 nm)。紫色條表示 0.2 分鐘時間片段的餾分收集

圖 2. 餾分收集器中收集的 6 種餾分的再分析疊加色譜圖(UV 260 nm)。表格(插圖)顯示主峰的純度和產量
AdvanceBio 寡核苷酸 21.2mm 制備柱與分析柱,無需繁瑣方法轉移,且用相同固定相做分析表征;其新型 4μm 填料(同系列鍵合相),能平衡載樣量與分離度。

圖 3. 使用 DBA/TRIS 和聚焦梯度對短 ON 進行制備型純化運行。綠色條代表餾分收集的時間片段
安捷倫制備型液相色譜放大計算器
如需了解此計算器如何提供幫助,請單擊鏈接:放大計算器

寡核苷酸純化解決方案
AdvanceBio 寡核苷酸柱以 4μm 核-殼填料(優(yōu)于傳統(tǒng) 5μm 全多孔填料)解決分離效率低問題;安捷倫獨特填料修飾耐高 pH 且鍵合封端 C18 固定相,可以在高 pH 與溫度條件下保障寡核苷酸分析;同時還提供 2.7μm、4μm 粒徑應對方法放大難,適配各類分析與制備需求。

圖 4. 寡核苷酸純化工作流程

圖 5. 在不同規(guī)模下運行的安捷倫系統(tǒng)的分析物數(shù)量和流速比較
其他制備純化填料/ 色譜柱選擇
Agilent PLRP-S 色譜柱
反相填料 – 用于離子對反相模式
五種孔徑:100Å、200Å、300Å、1000Å 和 4000Å
填料粒徑范圍從 3µm 到 50µm
Agilent PL-SAX 色譜柱
出眾的聚合物陰離子交換填料
兩種孔徑:1000Å 和 4000Å
填料粒徑范圍從 5µm 到 30µm
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