制藥企業(yè)面臨著一個(gè)關(guān)鍵難題：如何在提高細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)可靠性和降低風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)，應(yīng)對(duì)緊迫的可持續(xù)發(fā)展問題和不斷變化的供應(yīng)鏈挑戰(zhàn)。幾十年來，源自鱟血的傳統(tǒng)鱟試劑檢測(cè)一直是細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，用于確保產(chǎn)品安全。然而，隨著行業(yè)的不斷發(fā)展，其優(yōu)先事項(xiàng)也在發(fā)生變化 — 每年進(jìn)行超過8000萬次內(nèi)毒素檢測(cè)，其中絕大多數(shù)依賴于鱟試劑。隨著人們對(duì)環(huán)境管理意識(shí)的增強(qiáng)以及制藥行業(yè)對(duì)無動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法的承諾，尋求更可持續(xù)的替代方案已成為一種趨勢(shì)。重組C因子試劑（rFC）和重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）的出現(xiàn)，為兼顧可靠性和可持續(xù)性提供了一種具吸引力的解決方案。這些合成替代方案無需使用動(dòng)物源性材料，同時(shí)與傳統(tǒng)的鱟試劑相比，在準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性和特異性方面均有所提升。然而，這些重組技術(shù)的成功應(yīng)用需要進(jìn)行全面的驗(yàn)證，尤其要重視針對(duì)本土微生物的測(cè)試。本文探討了在過渡到重組試劑時(shí)評(píng)估本土微生物的重要性，這有助于生產(chǎn)商實(shí)現(xiàn)降低風(fēng)險(xiǎn)和可持續(xù)發(fā)展的目標(biāo)。

重組C因子（rFC）是一種基于終點(diǎn)熒光法的檢測(cè)方法，它利用單一重組蛋白克隆 — C因子 — 來檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素。該檢測(cè)方法需在設(shè)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行孵育，并在檢測(cè)開始和結(jié)束時(shí)進(jìn)行讀數(shù)。當(dāng)存在內(nèi)毒素時(shí)，熒光讀數(shù)儀會(huì)放大熒光底物的信號(hào)。由于rFC僅包含C因子克隆而非完整的信號(hào)級(jí)聯(lián)，因此它無法檢測(cè)β-葡聚糖。

相比之下，重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）基于吸光度動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，能更精確地模擬傳統(tǒng)的鱟試劑級(jí)聯(lián)反應(yīng)。rCR使用與現(xiàn)有鱟試劑相同的儀器，并隨時(shí)間進(jìn)行多次讀數(shù)。rCR檢測(cè)利用重組C因子、重組B因子和重組凝固酶原來模擬天然酶促級(jí)聯(lián)反應(yīng)。這種動(dòng)態(tài)顯色法通過隨時(shí)間進(jìn)行多次讀數(shù)來測(cè)量顏色變化，與傳統(tǒng)的動(dòng)態(tài)顯色鱟試劑方法類似。