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基于GC-MS/MS的人標(biāo)準(zhǔn)血清中代謝物的分析
閱讀：156 發(fā)布時(shí)間：2026-2-5單四極桿型GC-MS具有出色的色譜分離能力，測定穩(wěn)定，因此，廣泛用于進(jìn)行生物體內(nèi)代謝物全面性解析的代謝組學(xué)解析。但是，生物樣品含有較多的代謝物與多種基質(zhì)，使用單四極桿GC-MS有時(shí)難以實(shí)施分離。而三重四極桿型GC-MS/MS的MRM在四極桿Q1和四極桿Q3進(jìn)行2次MS分離，因此，較使用一個(gè)四極桿進(jìn)行MS分離的掃描模式測定，可以除去由干擾成分造成的峰重疊影響，獲得高靈敏度且準(zhǔn)確的定量結(jié)果。 本應(yīng)用方案利用GC/MS代謝成分?jǐn)?shù)據(jù)庫Ver.2中的掃描及MRM方法測定人標(biāo)準(zhǔn)血清中的代謝物，并比較了測定結(jié)果。
分析條件 ：做前處理時(shí)，首先向50ul的人標(biāo)準(zhǔn)血清中添加內(nèi)標(biāo)2-Isopropylmalic acid，然后使用甲醇/ 水/ 氯仿溶液(2.5:1:1)提取代謝物，進(jìn)行甲肟和三甲基硅基衍生化[1]。對(duì)于前處理后的樣品按照GC/MS代謝成分?jǐn)?shù)據(jù)庫Ver.2的方法，以掃描及MRM模式分別各測定6次。Table 1表示分析條件。
分析結(jié)果 ：Fig. 1表示基于掃描及MRM模式的血清中代謝物的質(zhì)色圖。這里表示的4個(gè)成分由于在掃描模式時(shí)受干擾成分影響，造成靈敏度不足，因此，或是沒有檢出或是重復(fù)分析精度在14%以上。而使用MRM模式，去除了干擾成分的影響，可以進(jìn)行高靈敏度測定，獲得了重復(fù)分析精度在6.5%以下的良好結(jié)果(Table 2)。
