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當(dāng)前位置:青島普瑞邦生物工程有限公司>>技術(shù)文章>>莫能菌素項(xiàng)目解決方案----柱后衍生法
一.方案背景
莫能菌素作為飼料常用聚醚類(lèi)抗生素,對(duì)防控家禽球蟲(chóng)病、提升畜禽飼料利用率作用關(guān)鍵,其A、B組分含量是否達(dá)標(biāo),直接決定飼料藥效與使用安全,是質(zhì)量管控核心要點(diǎn)。
目前莫能菌素檢測(cè)方法多樣,常見(jiàn)的有高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等,不同方法在精準(zhǔn)度、適用場(chǎng)景上各有特點(diǎn)。青島普瑞邦生物工程有限公司依據(jù)相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),特推出柱后衍生-高效液相色譜法專(zhuān)屬解決方案,通過(guò)Pribolab MDS-3000S柱后衍生器與HPLC方法聯(lián)用實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)。為保障檢測(cè)工作科學(xué)高效開(kāi)展,特制定本檢測(cè)方案。

二、高效液相色譜—柱后衍生
1. 檢測(cè)原理
第一步:反相色譜分離,莫能菌素A、B組分的極性和疏水性存在細(xì)微差異,在反相色譜柱中,它們與固定相、流動(dòng)相的相互作用程度不同,會(huì)先后被洗脫出來(lái),從而實(shí)現(xiàn)兩組分的有效分離。
第二步:柱后衍生與紫外檢測(cè),分離后的組分流出色譜柱后,會(huì)和香草醛-硫酸甲醇衍生液充分混合,發(fā)生Komarowsky反應(yīng),生成在520nm波長(zhǎng)下有特征紫外吸收的有色衍生物;紫外檢測(cè)器會(huì)根據(jù)衍生物的吸收強(qiáng)度,與同條件下的標(biāo)準(zhǔn)品吸收信號(hào)對(duì)比,就能精準(zhǔn)定量莫能菌素A、B組分的含量。
2. 儀器方法
2.1 液相方法
·色譜柱:Pribolab®莫能菌素/鹽霉素衍生專(zhuān)用色譜柱(貨號(hào):EH04079)
·流動(dòng)相:Pribolab®莫能菌素/鹽霉素衍生試劑包(貨號(hào):DERE004)
·柱 溫:室溫
·檢測(cè)波長(zhǎng):520nm
·進(jìn) 樣 量:20uL
·流 速:0.7mL/min
2.2 衍生方法
·衍生試劑:Pribolab®莫能菌素/鹽霉素衍生試劑包(貨號(hào):DERE004)
·衍生溫度:98℃
·流 速:0.7mL/min
3. 檢測(cè)結(jié)果
3.1 線性
分別精密吸取50 ug/mL、100ug/mL、200ug/mL、300ug/mL、400ug/mL濃度的對(duì)照品溶液,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積,以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。


3.2 重復(fù)性
取濃度為 30 μg/mL 的莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)品溶液,連續(xù)進(jìn)樣 5 針,記錄各針?lè)迕娣e與保留時(shí)間。結(jié)果顯示,5 針檢測(cè)的莫能菌素B峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.78,莫能菌素A峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.14,符合檢測(cè)方法學(xué)要求。


3.3 系統(tǒng)適用性驗(yàn)證譜圖(莫能菌素A與B、甲基鹽霉素A與I)

三.方案配置
貨號(hào) | 型號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) |
EQ-MDS2010/2020 | MDS-3000/3100 | Pribolab® MDS 多功能光電衍生系統(tǒng) |
DERE004 | 1000mL | Pribolab®莫能菌素/鹽霉素衍生試劑包(Derivatization reagent kit for salinomycin/monensin) |
EH04079 | 150mm | Pribolab®莫能菌素/鹽霉素衍生專(zhuān)用色譜柱(Special chromatographic column for salinomycin/monensin) |
MSS4009 | 不同規(guī)格 | Pribolab®鹽霉素標(biāo)準(zhǔn)品 |
MSS4010 | 不同規(guī)格 | Pribolab®莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)品 |
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