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ultra液相色譜柱再生方法
閱讀:113發(fā)布時間:2025-12-23
一、 再生前準(zhǔn)備
ultra液相色譜柱與試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備超純水、甲醇、乙腈、異丙醇等色譜級溶劑,以及適配的廢液收集瓶;確保液相色譜儀泵體、進樣閥無泄漏。
色譜柱檢查:再生前記錄色譜柱當(dāng)前柱效、峰形數(shù)據(jù),若柱內(nèi)有強保留污染物殘留,需先評估色譜柱是否有再生價值。
安全操作:操作時佩戴手套、護目鏡,避免有機溶劑接觸皮膚;保證實驗室通風(fēng)良好。
二、 通用再生步驟(反相色譜柱為主)
沖洗流動相殘留
卸下色譜柱,用超純水以低流速(0.2–0.3 mL/min)沖洗 30–60 分鐘,去除緩沖鹽等水溶性雜質(zhì),防止鹽類析出堵塞填料。
若流動相中含離子對試劑,需用 50% 甲醇水溶液沖洗 1–2 小時,再切換至純甲醇。
去除強疏水性污染物
依次用 100% 甲醇、100% 乙腈 沖洗色譜柱,流速保持 0.3–0.5 mL/min,每種溶劑沖洗體積為柱體積的 20–30 倍。
若污染物頑固,可選用異丙醇沖洗(注意異丙醇黏度高,需降低流速防止柱壓過高),沖洗后用甲醇過渡。
極性污染物清洗
對于含極性雜質(zhì)的色譜柱,用甲醇 - 水(1:1)混合液沖洗 60 分鐘,再用純甲醇沖洗至基線平穩(wěn)。
再生后平衡
用目標(biāo)分析方法的流動相平衡色譜柱,平衡體積不少于柱體積的 10 倍,直至基線穩(wěn)定后再進行樣品分析。
三、 特殊類型色譜柱再生注意事項
正相色譜柱:禁用含水溶劑沖洗,再生時依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯沖洗,最后用正己烷平衡保存。
離子交換色譜柱:先用對應(yīng) pH 值的緩沖溶液沖洗,再用去離子水沖洗至中性,最后用含 5% 甲醇的緩沖液保存。
手性色譜柱:優(yōu)先使用廠家推薦的再生溶劑,避免使用強極性溶劑,防止手性固定相破壞。
四、 再生后驗證與保存
性能驗證:ultra液相色譜柱再生完成后,注入標(biāo)準(zhǔn)品測試柱效、峰對稱性,若峰形改善、柱效恢復(fù)至原有水平的 80% 以上,說明再生成功。
長期保存:反相色譜柱用純甲醇密封保存,正相色譜柱用正己烷保存,兩端擰緊堵頭,放置在常溫、避光環(huán)境中。
RESTEK 瑞思泰康科技(北京)有限公司主營產(chǎn)品:ultra液相色譜柱-Restek液相色譜柱
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