摘要
本文建立了北柴胡配方顆粒特征圖譜的UHPLC測定方法。參照北柴胡配方顆粒國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中的色譜條件,采用色譜柱Shim-pack Velox C18,對參照物溶液和供試品溶液進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,在211nm下,供試品色譜中呈現(xiàn) 4個特征峰,并與對照藥材參照物色譜中的4個特征峰保留時間相對應(yīng),與柴胡皂苷a參照物峰相應(yīng)的峰為S峰,峰1和峰2的相對保留時間在規(guī)定值的±10%范圍之內(nèi),峰4的相對保留時間在規(guī)定值的±8%范圍之內(nèi),且柴胡皂苷a峰理論塔板數(shù)高于10000,滿足藥典要求。此方法可為北柴胡配方顆粒特征圖譜分析提供參考。
1. 實驗部分
01 參照物溶液的制備
取柴胡(北柴胡)對照藥材0.5g,置錐形瓶中,加水25 mL,加熱回流30分鐘,濾過,取續(xù)濾液20 mL,蒸干,加5%濃氨試液的50%乙醇溶液25 mL,超聲(功率250 W,頻率40 kHz)30分鐘,取出,放冷,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,作為對照藥材參照物溶液。另取柴胡皂苷a對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1 mL含75 μg的溶液,作為對照品參照物溶液。
02 供試品溶液的制備
取本品適量,研細(xì),取約1.0g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入含5%濃氨試液的50%乙醇溶液25mL,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHz)30分鐘,放冷,再稱定重量,用5%濃氨試液的50%乙醇溶液補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
03 分析條件
色譜柱:Shim-pack Velox C18(1.8 μm,2.1×100 mm;P/N:227-32007-03)
流 速:0.4 mL/min
進(jìn)樣量:3 μL
柱 溫:35 ℃
檢測器:211 /250 nm
流動相:A:水
B:乙腈
梯度程序如下:

2. 實驗結(jié)果
按照上述分析條件(1.3)進(jìn)行采集,參照物溶液和供試品溶液色譜圖如下:



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